Matsuyo Matsuno ist die Matriarchin der Familie Matsuno, die Ehefrau von Matsuzo Matsuno und die Mutter der Sextuplets: Osomatsu, Karamatsu, Choromatsu, Ichimatsu, Jyushimatsu und Todomatsu. Sie erscheint sowohl im ursprünglichen Osomatsu-kun-Manga als auch in der modernen Fortsetzung Mr. Osomatsu. In der späteren Serie wird sie als eine Hausfrau mittleren Alters mit kurzem grauem Haar dargestellt, das oft zu einem Knoten frisiert ist, und einer runden Brille, die sie aufgrund starker Kurzsichtigkeit benötigt.

Ihre Persönlichkeit balanciert fleißige Arbeitsmoral mit einer Neigung zur Hysterie aus. Sie führt den Haushalt weitgehend allein und muss ständig mit dem Chaos umgehen, das ihre sechs erwachsenen Söhne verursachen, die sich weigern, eine feste Anstellung zu finden. Trotz ihres Status als NEETs bewahrt sie eine relativ fröhliche Haltung, obwohl sie nicht davor zurückschreckt, ihre Frustration auszudrücken. Wenn ihr Temperament hochkocht, kann sie sehr emotional werden und ist schwer zu beruhigen, wobei sie gelegentlich eine prätentiöse oder selbstgefällige Ader zeigt. In ruhigeren Momenten zeigt sie eine pragmatische, resignierte Akzeptanz des Verhaltens ihrer Söhne und bezeichnet sie direkt als ihre NEETs.

Ihre Hauptmotivation ist es, die Familie funktionsfähig zu halten, trotz der Faulheit und Verantwortungslosigkeit der Sextuplets. Sie drängt sie nicht mit großer Kraft zur Unabhängigkeit, sondern fungiert als eine stetige, wenn auch genervte Stütze. Ihre Rolle in der Geschichte ist die einer Hintergrundfigur, die die absurde Komödie in einem Anschein häuslicher Realität verankert. Sie dient als Kontrast zur Unreife ihrer Söhne, indem sie oft mit trockenen Kommentaren oder plötzlichen Ausbrüchen reagiert, die die Lächerlichkeit ihrer Situationen hervorheben.

Zu den wichtigsten Beziehungen gehören ihr Ehemann Matsuzo, der ebenfalls tolerant gegenüber ihren Söhnen ist, und jeder der Sextuplets. Sie behandelt alle sechs mit gleicher Zuneigung und Verärgerung, obwohl sie gelegentlich ein tieferes Verständnis für ihre Dynamik zeigt. In einem Fall bemerkt sie, dass Osomatsu als symbolischer Galionsfigur für die Brüder dient, was auf ein Bewusstsein für ihre Gruppenidentität hindeutet. Die Entwicklung im Laufe der Serie ist subtil; sie bleibt als Charakter weitgehend statisch, aber Momente der Einsicht oder Zärtlichkeit verleihen ihr Tiefe über das Archetyp der geplagten Mutter hinaus. Zu ihren bemerkenswerten Fähigkeiten gehören die Führung eines großen Haushalts mit einem begrenzten Budget und das Ertragen der endlosen Eskapaden ihrer Söhne mit bemerkenswerter Geduld, die von kontrollierten Ausbrüchen unterbrochen wird. Sie hat keine übernatürlichen oder kämpferischen Fähigkeiten; ihre Stärke liegt in ihrer Widerstandsfähigkeit und ihrem pragmatischen Ansatz zum Familienleben.