Ayame Sarutobi, von ihren Bekannten meist Sacchan oder Sa-chan genannt, ist eine Kunoichi, also eine weibliche Ninja, die ursprünglich als Mitglied der Elite-Einheit Oniwabanshuu des Shogunats ausgebildet wurde. Nach der Auflösung dieser Organisation begann sie als freiberufliche Auftragsmörderin zu arbeiten, die sich auf korrupte Individuen spezialisiert hat, und hat außerdem einen Teilzeitjob im Kunoichi-Café. Sie hat langes, hellviolettes Haar und ein Schönheitsmal unter ihrem rechten Auge. Ihre typische Kleidung besteht aus einem modifizierten Kampfsport-Oberteil mit abgeschnittenen Ärmeln, einem roten Gürtel, dunkelvioletten Unterarmstulpen und einem dazu passenden Schal. Sie ist 169 Zentimeter groß und hat eine bemerkenswerte physische Figur, die gelegentlich von anderen Charakteren kommentiert wird.

Das auffälligste und unmittelbar erkennbarste Merkmal von Sacchan ist ihre extrem schlechte Sehkraft. Sie ist stark kurzsichtig, bis zu dem Punkt, dass sie ohne ihre unverwechselbaren dunkelroten Brillen fast blind ist und nicht zuverlässig zwischen Lebewesen und unbelebten Gegenständen unterscheiden kann. Diese Sehbehinderung ist eine ständige Quelle komödiantischer Missgeschicke, die sie oft dazu führt, andere Personen, wie zum Beispiel Kagura, die als Gintoki verkleidet ist, mit ihrem Schwarm zu verwechseln. Ihre Brille, die sie von ihrer verstorbenen Großmutter geerbt hat, hat für sie über ihre praktische Notwendigkeit hinaus einen bedeutenden emotionalen Wert.

Was die Persönlichkeit betrifft, ist Sacchan ein Charakter von dramatischen und oft widersprüchlichen Extremen. Einerseits kann sie laut, ausgelassen und offen pervers sein, wobei sie oft schreit oder kreischt, wenn sie aufgeregt ist. Andererseits wird sie, wenn sie ihren beruflichen Pflichten nachgeht, ernst, konzentriert und hochkompetent und zeigt ein Maß an Ernsthaftigkeit, das in starkem Kontrast zu ihrem üblichen Verhalten steht. Ihr ausgeprägtestes und beständigstes Persönlichkeitsmerkmal ist jedoch eine obsessive, masochistische Schwärmerei für den Samurai Sakata Gintoki. Diese Besessenheit begann nach ihrer ersten Begegnung mit ihm, bei der er sie rettete, obwohl sie ihn belogen hatte. Seit diesem Moment hat sie sich dem Stalking von ihm verschrieben, versteckt sich oft in unwahrscheinlichen Orten in der Nähe seines Büros und interpretiert seine aggressiven Beleidigungen und körperliche Gewalt als Formen zärtlicher Aufmerksamkeit. Diese Dynamik hat eine masochistische Seite ihrer Persönlichkeit geweckt, die ausschließlich auf Gintoki gerichtet ist, und sie genießt die harte Behandlung, die er ihr zuteilwerden lässt.

Trotz ihrer scheinbar oberflächlichen Art wird Sacchan von einem starken Gefühl der Loyalität und Pflicht angetrieben. Sie hegt eine tiefe, feierliche Verpflichtung, den ehemaligen Shogun Tokugawa Shigeshige zu beschützen, den sie seit ihrer Kindheit kennt und dem sie geschworen hat, ihn zu bewachen. Diese Loyalität erstreckt sich auch auf ihre ehemaligen Oniwabanshuu-Kameraden, insbesondere Hattori Zenzou. Obwohl ihre Beziehung dadurch gekennzeichnet ist, dass sie ihn ständig schikaniert und auf komödiantische Weise auf seine Hämorrhoiden abzielt, erkennt sie ihn als fähigen Anführer an und ist bereit, in ernsten Situationen ihr Leben zu riskieren, um ihn zu retten, was eine tiefe zugrundeliegende Verbundenheit zeigt. Ihre Beziehungen zu anderen weiblichen Charakteren sind ähnlich komplex. Sie betrachtet Shimura Tae als eine primäre romantische Rivalin, was zu häufigen komödiantischen Auseinandersetzungen führt, doch sie hat auch echte Fürsorge für sie gezeigt, wie zum Beispiel, als sie einer hospitalisierten Tae unter Tränen zuredete, gegen eine Krankheit zu kämpfen. Anfangs zankt sie sich auch mit der Kurtisane Tsukuyo, einer weiteren Rivalin um Gintokis Zuneigung, aber die beiden entwickeln schließlich eine Freundschaft, wobei Sacchan sie liebevoll Tsukki nennt.

Saccharis Rolle in der Geschichte ist in erster Linie die eines wiederkehrenden komödiantischen Gegenparts für Gintoki und die Yorozuya, aber sie nimmt auch an wichtigen ernsten Handlungsbögen teil. Im Shogun-Attentats-Arc trifft sie sich mit den Überresten der Oniwabanshuu, um den Shogun zu beschützen, kämpft heftig an Bord eines feindlichen Schiffs und erleidet Verletzungen. Ihre Entwicklung, wenn auch subtil, zeigt, dass ihre Fixierung auf Gintoki nicht völlig eindimensional ist. Im Film "Be Forever Yorozuya" weigert sie sich, ihre Haare zu schneiden, und bewahrt ihr Aussehen fünf Jahre lang, in der festen Überzeugung, dass Gintoki noch lebt und zurückkehren wird, was eine aufrichtigere und geduldigere Hingabe unter ihrer obsessiven Fassade hervorhebt. Sie hat auch Wachstum darin gezeigt, den Wert von Freundschaft über materielle Gegenstände zu verstehen, wie zu sehen ist, als sie sich mit dem Verlust einer Brille abfindet, die ihr Gintoki geschenkt hat.

Als Kämpferin besitzt Sacchan außergewöhnliche körperliche Fähigkeiten und ist eine Meisterin des Ninjutsu. Ihre bemerkenswerteste Fähigkeit ist ihre perfekte Zielgenauigkeit mit Kunai, die sie selbst ohne Brille mit punktgenauer Präzision werfen kann. Ihr Kampfstil ist unkonventionell und beinhaltet die Verwendung von Natto, einem klebrigen fermentierten Bohnengericht, das sie einsetzt, um ihre Feinde zu fangen und bewegungsunfähig zu machen. Sie zeigt auch hohe Beweglichkeit, verbesserte Reflexe und eine bemerkenswerte Schmerztoleranz. Bei einer Gelegenheit wurde ihre Brille vorübergehend vom Erfinder Gengai aufgerüstet, um Funktionen wie Laserstrahlen und einen Schutzengel-Modus zu enthalten, was es ihr ermöglichte, eine Technik namens "Flug der hundert Brillen" auszuführen. Trotz ihrer schlechten Sehkraft, die eine anhaltende Schwäche darstellt, macht ihre allgemeine Kampfkraft sie zu einer beeindruckenden Auftragsmörderin und einer wertvollen Verbündeten im Kampf.