Kondou Isao ist der Kommandeur der Shinsengumi, der Spezialpolizei, die in Edo operiert. Ursprünglich war er der Meister einer kleinen Kampfschule in Bushuu, wo er Toushirou Hijikata und Sougo Okita traf und anwarb, wodurch eine enge Bindung entstand, die zur Grundlage seines Lebens wurde. Auf der Suche nach größeren Chancen führte er die Mitglieder seiner Kampfschule nach Edo und verwandelte sie schließlich in die mächtige Organisation, die als Shinsengumi bekannt ist.

Seine Persönlichkeit ist geprägt von einer aufrichtigen, reinen und zutiefst ehrlichen Art. Er besitzt einen unerschütterlichen Willen und ein starkes Gerechtigkeitsgefühl, was seinen Untergebenen heftige Loyalität einflößt. Hijikata beschreibt ihn als die Seele der Shinsengumi, wobei jedes andere Mitglied als das Schwert dient, das ihn beschützt. Diese Reinherzigkeit macht ihn jedoch oft naiv und zu vertrauensselig gegenüber anderen, eine Schwäche, die ausgenutzt werden kann. Als Gegengewicht zu seiner ernsten Führungsrolle hat er eine ausgeprägte, äußerst komische Seite. Er ist bekannt für seine obsessive, unerwiderte Liebe zu Shimura Tae, der er endlos Heiratsanträge macht und nachstellt. Dies führt meist dazu, dass er gewaltsam abgewiesen wird. Er verhält sich oft albern und kindisch, zieht sich manchmal bis auf seinen Fundoshi aus als bizarren Ausdruck von Ehrlichkeit, was ihm von seinen Kameraden den Spitznamen Gorilla einbringt. Er wird hauptsächlich von seiner Pflicht motiviert, seine Freunde und seine Ideale zu beschützen, wobei seine Gefühle für Otae eine Schicht komödiantischer Verletzlichkeit hinzufügen.

In den Gintama-Filmen spielt Kondou eine zentrale Rolle in den Operationen der Shinsengumi. Im Benizakura-Film führt er seine Truppen gegen den abtrünnigen Bansai und die Kiheitai und arbeitet mit Gintoki und der Yorozuya zusammen. Im zweiten Film, der mehrere Jahre nach einem verheerenden Ereignis spielt, treibt ihn seine Loyalität zu seinen gefallenen Kameraden dazu, sich gegen die korrupte Regierung zu wenden, und er wird zu einem entschlossenen Anführer des Widerstands. Dieser Handlungsbogen zeigt seine Entwicklung von einem komödiantischen Polizeichef zu einem Revolutionär, der bereit ist, alles für seine Prinzipien zu opfern.

Seine wichtigsten Beziehungen verankern seinen gesamten Charakter. Seine Bindung zu Toushirou Hijikata ist die eines Bruders; Hijikata verwaltet die täglichen Operationen der Shinsengumi und bringt Kondou auf den Boden zurück, wenn er sich zu sehr hinreißen lässt. Seine Beziehung zu Sougo Okita ist von tiefem gegenseitigem Vertrauen geprägt, obwohl Sougo ihn ständig mit einem sarkastischen Unterton verspottet und quält. Seine Dynamik mit Gintoki Sakata ist eine Mischung aus Rivalität und tiefem gegenseitigem Respekt, da sie einen gemeinsamen Geist erkennen, das zu beschützen, was wichtig ist. Seine unerwiderte Zuneigung zu Otae ist der wichtigste wiederkehrende Gag seines Privatlebens, doch die Aufrichtigkeit seiner Gefühle ist echt. Wie sein ehemaliger Rivale Itou Kamotarou einst bemerkte, ist Kondou ehrlich, rein und unverdorben, ein Mann, dessen Güte Menschen anzieht, ohne dass er es merkt.

In Bezug auf Fähigkeiten ist Kondou ein Meisterschwertkämpfer, der einen kraftvollen, auf einen Treffer ausgelegten Stil bevorzugt, der seinen großen, muskulösen Körperbau optimal nutzt. Er ist ein fähiger Stratege und ein inspirierender Kommandeur, der von vorne führt. Während seine komödiantischen Eskapaden oft seine Kompetenz überschatten, machen ihn seine körperliche Stärke, Widerstandsfähigkeit und sein unerschütterlicher Geist zu einem formidablen Verbündeten und einem gefährlichen Feind.