Knuckles ist ein rotes anthropomorphes Ameisenigel und eine der Hauptfiguren im Sonic-X-Anime. Als letztes überlebendes Mitglied des Knuckles-Clans verbrachte er den Großteil seines Lebens zurückgezogen auf Angel Island, einer schwebenden Insel hoch am Himmel, wo er als treuer Hüter des Master Emerald diente, eines mächtigen Edelsteins, der die Chaos Emeralds kontrolliert. Diese einsame Erziehung machte ihn zu einem Einzelgänger und ließ ihn sozial unerfahren zurück, was zu seiner ehrlichen, aber leichtgläubigen Natur beitrug. Er wird oft von Dr. Eggman hereingelegt, der ihn glauben lässt, dass Sonic und Tails eine Bedrohung seien, was zu Konflikten führt, obwohl er die Täuschung schließlich erkennt und mit ihnen zusammenarbeitet.

In Sonic X wird Knuckles als wild, zäh und stur beschrieben, mit einer ernsten und entschlossenen Haltung im Kampf. Er ist ein Meister der Kampfkünste und ein erfahrener Schatzsucher, der sich auf seine immense körperliche Stärke verlässt, um Felsen zu zertrümmern und Feinde zu überwältigen. Er kann mit seinen dreadlockartigen Stacheln durch die Luft gleiten und mit den Stacheln an seinen Handschuhen Wände erklimmen, und anders als Sonic kann er schwimmen. Trotz seiner coolen Fassade hat er ein hitziges Temperament und ist leicht reizbar, und er ist besonders schüchtern in der Nähe von Mädchen. Er ist seiner Pflicht äußerst treu und handelt lieber nach eigenem Ermessen, wie Sonic einmal bemerkte: „So ist Knuckles. Er macht die Dinge auf seine eigene Weise.“ Sein Lieblingsessen sind Trauben, und er mag keine hellen, grellen Umgebungen.

Knuckles' Hauptmotivation ist der Schutz des Master Emerald, eine Verantwortung, die er von seinen Vorfahren geerbt hat. Nach dem Chaos-Control-Ereignis, das ihn auf die Erde transportierte, widmet er sich der Suche nach den Chaos Emeralds, damit er nach Angel Island zurückkehren und seine Wächterrolle wieder aufnehmen kann. In der ersten Staffel von Sonic X sind seine Auftritte begrenzt, und er tritt oft als Rivale von Sonic auf, ohne ein echter Feind zu sein. In der zweiten Staffel wird seine Rolle aktiver, da er seine Stärke einsetzt, um die Chaos Emeralds zu finden und sich gegen Eggmans Machenschaften zu verteidigen. In der dritten Staffel, die im Weltraum spielt, spielt er eine entscheidende Rolle bei der Energieversorgung des Raumschiffs Blue Typhoon, indem er die Energie des Master Emerald nutzt. Dies führt letztendlich zur Zerstörung des Master Emerald, als er zur Energieversorgung der Sonic-Overdrive-Kanone verwendet wird, um die Metarex zu besiegen, was einen bedeutenden Wendepunkt in seiner persönlichen Reise darstellt.

Seine Beziehungen zu anderen Charakteren zeigen eine allmähliche Entwicklung. Er und Sonic beginnen als häufige Gegner aufgrund von Eggmans Manipulationen, entwickeln aber später ein starkes gegenseitiges Verständnis und Respekt, obwohl Knuckles manchmal Sonics sorglosen und abenteuerlichen Lebensstil beneidet. Er hat eine spielerische, streitlustige Dynamik mit Rouge the Bat, besonders in der dritten Staffel, mit Andeutungen einer unausgesprochenen romantischen Spannung. Er scheint auch einen heimlichen Schwarm für Amy Rose zu haben, obwohl dies nicht tiefgehend erforscht wird. Trotz seiner anfänglichen Zurückhaltung, sich auf andere zu verlassen, entwickelt er sich zu einem zuverlässigen und heldenhaften Verbündeten, der bereit ist, sein wertvollstes Besitztum für das Gemeinwohl zu opfern. Sein Charakter verkörpert den Kontrast zwischen dem Berg, standhaft und an die Pflicht gebunden, und dem Wind, frei und stets in Bewegung, und seine Reise in Sonic X hebt seinen Kampf mit dieser Identität hervor, die ihn letztendlich dazu führt, einen breiteren Sinn jenseits der bloßen Bewachung zu umarmen.