Geboren als Sohn des gewalttätigen Alkoholikers Dario Brando im Nordosten Londons, vergiftete Dio Brando seinen Vater und nutzte eine Schuld aus, um sich um 1880 von George Joestar I adoptieren zu lassen. Bei seiner Ankunft im Joestar-Anwesen trat Dio sofort brutal Jonathans Hund Danny, was den Beginn seiner gnadenlosen psychischen und physischen Quälerei seines Adoptivbruders markierte. Diese Grausamkeit erstreckte sich darauf, Jonathans Freundin Erina Pendleton gegen ihren Willen zu küssen und Danny verbrennen zu lassen. Sieben Jahre lang pflegte Dio eine trügerische Freundschaft, während er heimlich George Joestar vergiftete, um das Vermögen an sich zu reißen. Als Jonathan ihn entlarvte, testete Dio eine alte Steinmaske an einem Londoner Passanten und erschuf versehentlich einen Vampir. In die Enge getrieben vom Anwesen durch Jonathan und die Behörden, aktivierte Dio die Maske mit Georges Blut und verwandelte sich in einen Vampir. Er erlangte übermenschliche Kraft, Regeneration, eisbasierte Angriffe und die Space Ripper Stingy Eyes-Technik. Nach der Zerstörung des Anwesens durch Feuer floh Dio nach Windknight’s Lot. Dort baute er eine Armee von Zombies – Jack the Ripper, Bruford und Tarkus –, indem er sein Wesen in Leichen injizierte, und versuchte, Pocos Schwester in einen Vampir zu verwandeln. Jonathan, der von Will A. Zeppeli in Ripple (Hamon)-Energie trainiert worden war, konfrontierte ihn. Dio wurde im Kampf zerstückelt und schien besiegt, doch sein abgetrennter Kopf überlebte mit Hilfe des Handlangers Wang Chan. 1889 lauerte Dio Jonathan und Erina auf ihrer Hochzeitsreise auf. Er verletzte Jonathan tödlich, wurde jedoch von einer Explosion erfasst, nachdem Jonathan das Schiff sabotiert hatte. Um zu überleben, pflanzte Dio seinen Kopf auf Jonathans Körper, bevor er sich in einem Sarg versiegelte, der auf den Meeresgrund sank. Die Filmadaption von 2007 kürzte oder ließ Ereignisse wie das Rugby-Match, Speedwagons Beteiligung und Jonathans Erhalt des Schwertes Luck & Pluck aus. Sie zeigte Dios Gefriertechnik ohne Erklärung der Mechanik und verlegte die finale Schiffskonfrontation in den Pazifischen Ozean. In allen Darstellungen zeigt Dio durchgehend einen tiefen Mangel an Empathie, manipulativen Charme und Grandiosität, wobei er andere ausschließlich als Werkzeuge betrachtet, was in seinem Umgang mit Frauen und Handlangern deutlich wird. Sein treibender Ehrgeiz führt ihn dazu, Macht mit allen Mitteln zu erlangen, einschließlich der Ablehnung seiner Menschlichkeit, was seine angeborene psychopathische Grausamkeit offenbart. In Kampfspiel-Adaptionen spiegelt sein Moveset vampirische Fähigkeiten wie lebensraubende Angriffe und eisbasierte Spezialtechniken wider.