Mitsuki Mashiba ist die jüngere Zwillingsschwester von Youhei Mashiba und ein ehemaliges Mitglied der alten Delinquentenbande von Kyouko Shirafuji. Sie wird in der zweiten Staffel der Serie eingeführt, wo sie vorübergehend als Köchin im Restaurant Wagnaria einspringt. Außerhalb des Restaurants arbeitet sie als Versicherungsvertreterin, ein konventioneller Job, der stark im Kontrast zu ihrer Vergangenheit steht.

Vom Charakter her ist Mitsuki hitzköpfig und leicht aus der Fassung zu bringen, besonders wenn sie an ihr früheres delinquentes Aussehen erinnert wird, das sie peinlich findet. Anders als ihr Bruder Youhei, der eher gelassen und etwas schüchtern ist, hat Mitsuki eine nervöse und ungeduldige Seite. Trotzdem ist sie fleißig und gewissenhaft, auch wenn sie eine gewisse Tollpatschigkeit bewahrt, die ihren Zwilling widerspiegelt. Sie ist auch äußerst loyal, besonders gegenüber Kyouko, die sie mit tiefem Respekt betrachtet und stets bereit ist, ihr zu helfen, wenn sie gerufen wird.

Ihre Motivationen werden von dem Wunsch angetrieben, ihre delinquente Vergangenheit hinter sich zu lassen und ein respektables Leben zu führen, doch sie kann ihre alten Bindungen nicht vollständig lösen. Sie wird aus Sorge in die Beziehungen zu den anderen Charakteren verwickelt, etwa wenn sie sich um Yachiyo Todoroki sorgt und später ein beschützendes Interesse an Jun Satou entwickelt. Diese Sorge äußert sich oft in einer direkten, manchmal konfrontativen Art, aber sie entspringt echter Fürsorge.

In der Geschichte dient Mitsuki als Nebenfigur, deren Auftritte durch ihre hitzigen Auseinandersetzungen mit ihrem Bruder und ihre unbeholfenen Interaktionen mit dem Wagnaria-Personal komische Erleichterung bieten. Ihre Rolle hebt das Thema von Charakteren hervor, die mit ihrer Vergangenheit ringen, während sie sich im Alltag mit Arbeit und Beziehungen zurechtfinden.

Zu ihren wichtigsten Beziehungen gehören ihr Zwillingsbruder Youhei, mit dem sie eine streitlustige, aber letztlich liebevolle Bindung teilt; Kyouko Shirafuji, ihre ehemalige Bandenführerin, die sie vergöttert; und später Jun Satou und Yachiyo, in deren Dynamik sie vorsichtig eintritt. Im Laufe der Serie zeigt Mitsuki eine subtile Entwicklung, da sie sich mit ihrer reformierten Identität wohler fühlt und offener für die Menschen um sie herum wird, auch wenn sie ihre scharfe Kante nie vollständig ablegt.

Mitsuki besitzt keine übernatürlichen oder außergewöhnlichen Fähigkeiten. Ihre bemerkenswerten Eigenschaften sind ihr starkes Loyalitätsgefühl, ihr hitziges Temperament und ihre Fähigkeit, sich von einem delinquenten Hintergrund an einen konventionellen Arbeitsplatz anzupassen, auch wenn der Übergang ein anhaltender Kampf bleibt.