Usagi Tsukino lebt als gewöhnliche 14-Jährige, die die Juuban Municipal Junior High School besucht und im Tokioter Stadtteil Azabu-Juuban mit ihren Eltern, Ikuko und Kenji Tsukino, sowie ihrem jüngeren Bruder Shingo wohnt. Ihre Mutter schimpft häufig mit ihr wegen schlechter Noten, und sie erlebt die typische Geschwisterrivalität mit Shingo. Usagi zeichnet sich durch Ungeschicklichkeit, schulische Schwierigkeiten und Tränen aus und verbringt ihre Freizeit damit, Snacks zu verschlingen, auszuschlafen, Manga zu lesen, einzukaufen und Videospiele zu spielen. Dieses banale Dasein zerbricht, als sie Luna rettet, eine mysteriöse sprechende schwarze Katze. Luna enthüllt Usagis Bestimmung als Sailor Moon, Hüterin der Liebe und Gerechtigkeit, und verleiht ihr eine Transformationsbrosche. Bald sammelt Usagi weitere Sailor Guardians um sich – Sailor Mercury (Ami Mizuno), Sailor Mars (Rei Hino), Sailor Jupiter (Makoto Kino) und Sailor Venus (Minako Aino) –, um die Erde zu beschützen und den legendären Silberkristall zu finden. Durch ihre Kämpfe deckt Usagi ihre eigene Vergangenheit als Prinzessin Serenity auf, die aus dem antiken Mondkönigreich wiedergeboren wurde, sowie ihre tiefe romantische Verbindung zu Mamoru Chiba, der Reinkarnation von Prinz Endymion und ihrem zukünftigen Ehemann, bekannt als Tuxedo Mask. Ihre Liebe wird schließlich eine Tochter hervorbringen, Chibiusa (Sailor Chibi Moon), und Usagi ist dazu bestimmt, als Neo-Queen Serenity im 30. Jahrhundert gemeinsam mit Mamoru über Crystal Tokyo zu herrschen. Angesichts der Bedrohung durch den Death Busters-Arc stellen sich Usagi und ihr Team der Mugen Academy, die energieraubende Daimons erzeugt. Dieser Konflikt führt drei mächtige äußere Sailor Guardians ein: Sailor Uranus (Haruka Tenoh), Sailor Neptune (Michiru Kaioh) und die wiedergeborene Sailor Pluto (Setsuna Meioh). Uranus und Neptune operieren zunächst allein, priorisieren die Beseitigung von Bedrohungen über die Rettung infizierter Menschen und geraten damit in Konflikt mit Usagis unerschütterlichem Engagement für Heilung und Erlösung. Usagis Kräfte wachsen während dieser Prüfung. Sie erhält den Cosmic Heart Compact, der ihre Super Sailor Moon-Transformation freischaltet. Später, mit dem Heiligen Gral – beschworen durch die vereinte Macht der inneren und äußeren Senshi – erlangt sie noch größere Stärke. Ihre Angriffe, darunter Moon Spiral Heart Attack und Rainbow Moon Heart Ache, gewinnen an verheerender Kraft, was ihre Rolle als oberste Beschützerin des Universums widerspiegelt. Ihre Signaturattacke Moon Healing Escalation bleibt zentral, da sie Feinde reinigt statt sie zu zerstören. Eine entscheidende Beziehung entsteht zwischen Usagi und Hotaru Tomoe, einer Schülerin der Mugen Academy, die heimlich die bösartige Mistress 9 und die schlafende Sailor Saturn, Hüterin der Stille und Zerstörung, beherbergt. Trotz Hotarus Verbindung zum Feind zeigt Usagi ihr tiefes Mitgefühl. Chibiusa knüpft ebenfalls eine enge Bindung zu Hotaru, was die emotionalen Einsätze erhöht. In der finalen Schlacht gegen Pharaoh 90 opfert sich Super Sailor Moon, um das Wesen zu besiegen, nur um unversehrt wieder aufzutauchen. Diese Tat löst Sailor Saturns Erwachen aus, die Pharaoh 90 vernichtet, aber globale Zerstörung verursacht. Usagi, die sich als Neo-Queen Serenity manifestiert, nutzt den Heart Moon Rod (aufgewertet zu einem Zepter), um die Erde zu heilen und die Gefallenen wiederzubeleben, einschließlich Hotaru, die als Säugling wiedergeboren wird. Durch diese Prüfungen reift Usagi erheblich. Obwohl sie ihre ausdrucksstarke Natur und gelegentliche Eifersucht beibehält, zeigt sie tiefe Empathie und lehnt tödliche Gewalt gegen manipulierte Menschen konsequent zugunsten von Erlösung ab. Ihre Führung festigt sich, während sie die Senshi gegen kosmische Bedrohungen vereint. Ihre Romanze mit Mamoru vertieft sich, und ihre Liebe erschließt häufig neue Kräfte wie den Spiral Heart Rod. In späteren Arcs steigt Usagi zu ihrer ultimativen Form auf, Eternal Sailor Moon, und erhält engelsgleiche Flügel und die Fähigkeit, das Universum wiederzubeleben. Sie akzeptiert vollständig ihre Zukunft als Neo-Queen Serenity und verlobt sich mit Mamoru, wobei sie einen pinkfarbenen Kristallring erhält, der ihre ewige Verbindung symbolisiert.