"Ro-Kyu-Bu! Yonkoma" ist eine Manga-Serie, die als Spin-off zur Hauptserie "Ro-Kyu-Bu!" fungiert und im Yonkoma-Format (vier Bildern pro Streifen) erzählt wird. Die Handlung dreht sich um eine Gruppe von Grundschülerinnen, die gemeinsam Basketball spielen, sowie um ihren Trainer, einen Oberschüler namens Subaru Hasegawa. Die Geschichte spielt in einer humorvollen und alltäglichen Umgebung, wobei der Fokus auf den Interaktionen zwischen den Charakteren und ihren gemeinsamen Erlebnissen liegt.

Subaru, der aufgrund eines Skandals an seiner Schule vorübergehend nicht am Basketballtraining teilnehmen darf, wird von seiner Tante, der Schulleiterin einer Grundschule, überredet, das Mädchen-Basketballteam der Schule zu trainieren. Das Team besteht aus fünf Mädchen: Tomoka Minato, ein talentiertes und ehrgeiziges Mädchen, das jedoch anfangs wenig Teamgeist zeigt; Maho Misawa, eine energiegeladene und enthusiastische Spielerin; Airi Kashii, ein schüchternes Mädchen mit einem starken Willen; Hinata Hakamada, die jüngste und kleinste Spielerin, die jedoch sehr motiviert ist; und Saki Nagatsuka, die ruhige und besonnene Spielerin, die oft als Vermittlerin fungiert.

Die Serie zeigt, wie Subaru und die Mädchen zusammenwachsen, während sie gemeinsam trainieren, an Turnieren teilnehmen und alltägliche Herausforderungen meistern. Der Humor entsteht oft aus den kindlichen und manchmal naiven Perspektiven der Mädchen sowie aus Subarus Versuchen, mit ihrer Energie und ihren Eigenarten umzugehen. Die Yonkoma-Struktur betont die komödiantischen und herzerwärmenden Momente, wobei die Charaktere durch ihre individuellen Persönlichkeiten und Dynamiken untereinander glänzen.

Neben dem Basketballtraining und den Wettkämpfen werden auch die persönlichen Geschichten der Charaktere beleuchtet, wie etwa ihre Freundschaften, ihre schulischen Herausforderungen und ihre Träume. Die Serie bleibt dabei leicht und unterhaltsam, ohne tiefgreifende Konflikte oder dramatische Wendungen, und konzentriert sich stattdessen auf die Freude am Sport und die zwischenmenschlichen Beziehungen.