"Mein Vater ist die Königin aller VTuber?! (Manga)" erzählt die Geschichte eines alleinerziehenden Vaters, der heimlich als virtueller YouTuber (VTuber) arbeitet, um für seine Tochter zu sorgen. Der Protagonist, ein gewöhnlicher Büroangestellter, verbirgt seine Identität als beliebter VTuber "Luna", der durch seinen Charme und sein Talent eine große Fangemeinde gewonnen hat. Seine Tochter, die nichts von seinem Doppelleben ahnt, ist selbst ein großer Fan von Luna und bewundert die Persönlichkeit, ohne zu wissen, dass es sich um ihren Vater handelt.

Die Handlung entwickelt sich um die Herausforderungen, die entstehen, als die Tochter beginnt, Verdacht zu schöpfen, und die Geheimhaltung immer schwieriger wird. Gleichzeitig muss der Vater seine Karriere als VTuber mit seinen familiären Pflichten in Einklang bringen, was zu humorvollen und herzerwärmenden Situationen führt. Die Dynamik zwischen Vater und Tochter steht im Mittelpunkt der Geschichte, wobei die Themen Identität, Familie und die moderne Welt der Online-Unterhaltung erkundet werden.

Neben den beiden Hauptfiguren gibt es eine Reihe von Nebencharakteren, darunter Kollegen aus dem Büro, Freunde der Tochter und andere VTuber, die die Handlung bereichern und zusätzliche Konflikte sowie Komik einbringen. Die Serie kombiniert Slapstick-Humor mit emotionalen Momenten und bietet einen Einblick in die Welt der virtuellen Influencer, während sie gleichzeitig die Bedeutung von Familie und Ehrlichkeit betont.