Jessie ist ein prominentes Mitglied von Team Rocket und die de facto Anführerin des Trios, zu dem ihre langjährigen Partner James und das sprechende Mauzi gehören. Ihre Vergangenheit ist von Härte und Verlust geprägt. Ihre Mutter Miyamoto war ein hochrangiges Team Rocket-Mitglied, das verschwand, als Jessie sehr jung war, während einer Mission, das schwer fassbare Pokémon Mew zu finden. Dies ließ Jessie in einem armen Pflegeheim zurück, wo sie manchmal Schnee essen musste, um zu überleben. Getrieben von dem Wunsch, etwas aus sich zu machen, versuchte sie mehrere Karrieren, bevor sie ihre Nische fand. Sie fiel in einer Schule zur Pokémon-Krankenschwester durch, als sie erkannte, dass die Einrichtung eigentlich für Chansey war, nicht für Menschen. Sie studierte auch an einem Institut für Pokémon-Technologie, wo sie James zum ersten Mal traf, aber das Paar erzielte die schlechtesten Noten in der Geschichte der Schule. Danach schlossen sie sich einer Fahrradgang an, und Jessie hatte auch kurze, erfolglose Versuche als Wetterreporterin, Pop-Idol, Model und sogar als Ninja.

Mit einer Vorliebe für das Dramatische hat Jessie eine kühne, eitle und äußerst ehrgeizige Persönlichkeit. Sie hält sich für eine große Schönheit und eine ausgezeichnete Schauspielerin, die für den Ruhm bestimmt ist, und sie empfindet tiefen Groll gegen jede Kritik, besonders wenn sie als alt bezeichnet wird oder ihr unverwechselbares magentafarbenes Haar beschädigt wird. Sie hat ein berüchtigt hitziges Temperament und kann grausam und konkurrierend sein, oft verspottet sie Ash und seine Freunde. Doch unter ihrer bösartigen Fassade besitzt Jessie ein starkes Gefühl der Loyalität und eine echte, wenn auch selten gezeigte Fähigkeit zur Fürsorge. Dies zeigt sich am deutlichsten in ihren tiefen Bindungen zu ihren eigenen Pokémon; sie hat mehrere von ihnen freigelassen, wie ihr Arbok und Dustox, als sie glaubte, dass es wirklich in ihrem besten Interesse war, frei zu sein.

Jessies Hauptrolle in der Erzählung ist die einer Antagonistin, die unermüdlich Ashs Pikachu als Geschenk für ihren Boss Giovanni, den Anführer von Team Rocket, jagt. Die aufwendigen und oft komödiantischen Pläne des Trios, das Pokémon zu fangen, sind ein fester Bestandteil der Serie, und sie werden regelmäßig nach einer Niederlage weggeblasen. In einer bedeutenden Entwicklung entdeckte Jessie ein Talent für Pokémon-Wettbewerbe. Unter dem Pseudonym Jesselina in der Sinnoh-Region zeigte sie eine professionellere und kreativere Seite und überwand ihre früheren Tendenzen zu betrügen. Ihre Fähigkeiten als Koordinatorin wuchsen erheblich, sodass sie mehrere Bänder gewinnen und sich für das Große Festival von Sinnoh qualifizieren konnte, wo sie sich als formidable Konkurrentin erwies. Sie pflegt eine erbitterte Rivalität mit den anderen Team Rocket-Agenten Butch und Cassidy.

Jessies bedeutendste Beziehungen sind die zu ihren Partnern. Sie und James haben eine lange, komplexe Geschichte, die vor Team Rocket begann, und sie teilen eine unzerbrechliche Bindung, oft kümmern sie sich umeinander wie um Familie. Mauzi dient als Übersetzer des Trios und enger Vertrauter. Ihre Beziehung zu Giovanni ist eher einseitig; während sie ihm fanatisch treu ist und davon träumt, seine Anerkennung zu gewinnen, weist er sie oft ab. Im Laufe der Serie hat Jessie bemerkenswertes Wachstum gezeigt und sich von einer rein intriganten Schurkin zu einer nuancierteren Figur mit echten Fähigkeiten als Koordinatorin und Trainerin entwickelt. Ihre persönliche Entwicklung spiegelt sich oft in ihrer Reise wider, von der Nutzung von Pokémon als Werkzeuge hin zur Bildung tiefer emotionaler Bindungen zu ihnen.

Als Trainerin hat Jessie eine Vorliebe für schlangenartige und Gift-Pokémon. Zu ihren bemerkenswerten Fähigkeiten gehören das Steuern verschiedener Mechas, das Entwickeln komplexer Fangstrategien und der Einsatz einer Reihe von Verkleidungen. Ihr Team im Laufe der Jahre umfasste Ekans (das sich später zu Arbok entwickelte und freigelassen wurde), Lickitung (eingetauscht gegen Woingenau, das ein permanentes und geliebtes Mitglied des Teams wurde), Seviper, Yanmega, Dustox (freigelassen) und später Pokémon wie Fleknoil, Quabbel und Mimigma.